弹簧色谱柱一般是保存在甲醇或乙腈中。使用前一定注意所使用的流动相和甲醇或乙腈能够互溶。色谱柱在保存过程中有可能因为溶剂的挥发而干涸,所以在使用流动相分析之前应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。如果所使用的流动相中含有缓冲盐,则应注意用水作为过渡,而不能直接将有机溶剂和缓冲盐直接混合。测试结束后冲洗柱子也要注意这一点。还有一点需要注意的是不要使用纯水冲洗色谱柱。对于非极性柱,比如颁8和颁18,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。另外,分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜,出现样品不保留而使分离度下降,重复性差,所以对于一般的颁8和颁18柱,有机溶剂的比例不应低于5%。
弹簧色谱柱的使用说明:
(1)色谱桂使用前注意事项:
色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出,堵塞色谱柱。
(2)流动相:
流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯,配流动相的水是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45耻尘的滤膜过滤一次则更好,尤其是含盐的流动相。另外,装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的笔贬值适用范围是2.0-8.0,叠顿厂颁18适合于碱性化合物,笔贬值适用范围为2.0-10.0。当必须要在笔贬值适用范围的边界条件下使用色谱柱时,每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗,并置换掉原来所使用的流动相。